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上海沪震实业有限公司
入驻年限:11 年
- 联系人:
游艳
- 所在地区:
上海 闵行区
- 业务范围:
ELISA 试剂盒、抗体、细胞库 / 细胞培养、试剂、耗材
- 经营模式:
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ELISA试剂盒实验前如何做好优化?
人阅读 发布时间:2017-11-30 11:59
ELISA试剂盒实验前如何做好优化?
ELISA检测试剂盒包被条件的优化:
1、包被液的挑选:通常常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,假如包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以运用pH7.2的磷酸盐缓冲液。
2、包被浓度的挑选:包被的最适浓度随固相载体和包被物的性质改变,通常蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要清晰对于特定包被抗原的最适包被浓度需求通过试验来断定。
3、包被温度的挑选:通常是4-8度条件下放置一个黑夜或者37度保温2小时,咱们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的坚持。
4、包被抗原的挑选:可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,因为分子量太小,通常难于直接吸附在酶标板上,通常都先使其与无关蛋白质,比如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上。
ELISA检测试剂盒加样的优化:
在这一进程中,通常状况下有三次加样,它们分别是加标本,加酶联系物,加底物。冻结血清融解后,蛋白质部分浓缩,散布不均,应充沛混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、缩短后即可获得。也可在板孔中参加稀释液,再在其参加血清标本,然后在微型震动器上震动1分钟以保证混和。通常说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超越一星期测定的需低温冰存。