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上海沪震实业有限公司
入驻年限:11 年
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游艳
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上海 闵行区
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ELISA 试剂盒、抗体、细胞库 / 细胞培养、试剂、耗材
- 经营模式:
生产厂商 代理商
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Western blotting组织蛋白样品的制备:
人阅读 发布时间:2017-04-25 12:57
Western blotting组织蛋白样品的制备:
(1) 手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中,洗去表面的血迹,将组织称量
后切成几个较小的组织块(0.1-1g),放入组织匀浆器中,按组织净重(g):哺
乳动物组织总蛋白提取试剂体积(ml)=1:10 的比例加入相应体积的哺乳动物
组织总蛋白提取试剂(需提前加入博士德酶抑制剂)进行匀浆,至组织研磨完
全。
(2)超声处理(同细胞蛋白样品的制备),处理完后置冰上裂解 4-5 小时。
(3)样品 10000 g/min 离心 10min,取中层蛋白溶液,加入等体积的博士德 2X 蛋白
上样缓冲液(AR0131)或 1/4 体积 5X 蛋白上样缓冲液(AR1112),混匀,置 100℃
水浴箱中变性 5 分钟。
(1) 手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中,洗去表面的血迹,将组织称量
后切成几个较小的组织块(0.1-1g),放入组织匀浆器中,按组织净重(g):哺
乳动物组织总蛋白提取试剂体积(ml)=1:10 的比例加入相应体积的哺乳动物
组织总蛋白提取试剂(需提前加入博士德酶抑制剂)进行匀浆,至组织研磨完
全。
(2)超声处理(同细胞蛋白样品的制备),处理完后置冰上裂解 4-5 小时。
(3)样品 10000 g/min 离心 10min,取中层蛋白溶液,加入等体积的博士德 2X 蛋白
上样缓冲液(AR0131)或 1/4 体积 5X 蛋白上样缓冲液(AR1112),混匀,置 100℃
水浴箱中变性 5 分钟。