上海沪震实业有限公司

https://shhzsw.biomart.cn

公众号

扫一扫
进入手机商铺

商家诚信度:
成立时间:2014年
入驻丁香通年限:7年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:77%
公众号

微信扫一扫
关注公众号

产品分类
公司荣誉
公司图片
联系方式
 公司地址
上海市杨浦区密云路1018号复旦科技园808室
邮编:200612
 联系电话
021-****5367登录查看商家电话
 传真号码
 电子邮箱
shhzsw01@****com登录查看商家邮箱
 公司网址
www.shuzbio.com
点击这里给我发消息
公司新闻

酶联免疫ELISA试剂盒的细节处理

发布时间:2019-08-12 15:37 |  点击次数:

酶联免疫ELISA试剂盒的细节处理

由于酶免ELISA试剂盒只能检测可溶性蛋白的含量,所以应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。为了保证检测的准确性,保存于-20℃或-80℃的样本最好在1~6个月内检测;4℃保存的样本应在1周内进行检测。另外,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会抑制HRP的活性,从而导致假阴性的结果。
一、细胞裂解液的细节处理:
1. 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2. 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3. 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
4. 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。
5. 4℃10000×g离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
二、酶免ELISA试剂盒组织匀浆液的细节处理:
1. 将组织样本用PBS(0.01M, PH 7.4)冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。
2. 将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分
3. 将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。
4. 吸取匀浆液到离心管,4℃5000×g离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。